Sisukord:

Kuidas laadite geelelektroforeesi?
Kuidas laadite geelelektroforeesi?

Video: Kuidas laadite geelelektroforeesi?

Video: Kuidas laadite geelelektroforeesi?
Video: Upgraded URLs Hangout on Air | Google Ads 2024, November
Anonim

Proovide laadimine ja agaroosigeeli käivitamine:

  1. Lisama laadimine puhver igale oma DNA proovile.
  2. Pärast tahkumist asetage agaroos geel sisse geel kast ( elektroforees ühik).
  3. Täida geel kasti 1xTAE (või TBE) kuni geel on kaetud.
  4. Hoolikalt koormus molekulmassiga redel esimesele rajale geel .

Kui palju DNA-d peate geelelektroforeesi jaoks laadima?

Summa Laaditav DNA süvendi kohta on muutuv. Väikseim kogus DNA etiidbromiidiga tuvastatav on 10 ng. DNA kuni 100 ng süvendi kohta põhjustab etiidiumbromiidiga määrdunud terava ja puhta riba geel.

Lisaks, miks kasutatakse geelelektroforeesis vee asemel puhvrit? The puhver on vajalik DNA lahuse pH hoidmiseks neutraalse taseme lähedal, sest kui see võib elektrolüüsi käigus happeliseks muutuda. Elektroodide põhjustatud elektrivoolud võivad põhjustada vesi molekulid dissotsieerumiseks ja H+ ioonide vabastamiseks.

Inimesed küsivad ka, miks kasutatakse geelelektroforeesis markerit?

Väiksemad killud liiguvad kiiremini ja seega kaugemale kui suuremad killud, kui nad madu läbivad geel . Miks markerit kasutatakse kui jooksevad killud läbi geel ? A marker sisaldab teadaoleva suurusega DNA fragmente. Markerid jooksevad igas geel võrdluseks teiste tundmatute fragmentidega geel sõidurajad.

Kui palju DNA-d on agaroosgeelil näha?

Enamik agaroosi geelid tehakse vahemikus 0,7% kuni 2%. 0,7% geeli tahe näitavad head eraldatust (eraldusvõimet) suurtest DNA fragmente (5–10 kb) ja 2% geeli tahe näitavad head eraldusvõimet väikeste fragmentide jaoks (0,2–1 kb).

Soovitan: