Mis toimib tavaliselt DNA kloonimisvektorina?
Mis toimib tavaliselt DNA kloonimisvektorina?

Video: Mis toimib tavaliselt DNA kloonimisvektorina?

Video: Mis toimib tavaliselt DNA kloonimisvektorina?
Video: MIS TOIMUB - veebruari lõpp 2022 2024, Detsember
Anonim

Seal on palju liike kloonimisvektorid , kuid kõige rohkem tavaliselt kasutatud on geneetiliselt muundatud plasmiidid. Kloonimine tavaliselt tehakse esmalt Escherichia coli abil ja kloonimisvektorid E. coli bakterite hulka kuuluvad plasmiidid, bakteriofaagid (nagu faag λ), kosmiidid ja bakteriaalsed kunstlikud kromosoomid (BAC).

Samuti küsiti, mis on vektor DNA kloonimisel?

Molekulaarselt kloonimine , a vektor on DNA Molekul, mida kasutatakse vehiikulina võõra geneetilise materjali kunstlikuks kandmiseks teise rakku, kus seda saab replitseerida ja/või ekspresseerida (nt plasmiid, kosmiid, lambda faagid). A vektor sisaldavad võõrast DNA nimetatakse rekombinantseks DNA.

Tea ka, kuidas vektorit kloonida? Eksperimentaalne protseduur

  1. Käivitage PCR ja puhastage PCR-produkt. Käivitage PCR, et amplifitseerida inserti DNA.
  2. Seedige oma DNA:
  3. Isoleerige oma insert ja vektor geelipuhastusega:
  4. Ligi oma sisestus oma vektorisse:
  5. Muutumine:
  6. Eraldage valmis plasmiid:
  7. Kontrollige oma plasmiidi järjestuse järgi:

Kuidas pBR322 sellega seoses kloonimisvektorina töötab?

pBR322 Plasmiid pBR322 oli üks esimesi plasmiide, mida sel eesmärgil kasutati kloonimine . See sisaldab geene, mis on resistentsed tetratsükliini ja ampitsilliini suhtes. DNA sisestamine spetsiifilistesse restriktsioonisaitidesse saab inaktiveerida tetratsükliini (toime, mida nimetatakse insertsiooniliseks inaktiveerimiseks) või ampitsilliiniresistentsuse geeni.

Milline tehnika võimaldab teha väga kiiresti palju koopiaid konkreetsest DNA lõigust?

Polümeraasi ahelreaktsioon

Soovitan: